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淺談奧林巴斯顯微鏡的視野大小的影響因素

更新時間:2017-09-04瀏覽:1042次

奧林巴斯顯微鏡是周密光學(xué)儀器,其要點技藝是光學(xué)技術(shù),產(chǎn)品格量的陡立,關(guān)鍵看光學(xué)體系(包括照明系統(tǒng),物鏡等)。奧林巴斯顯微鏡的視野大小與哪些因素有關(guān)呢?
奧林巴斯顯微鏡的視野即視場,是指顯微鏡一次所能觀察到被檢標本的范圍。顯微鏡的視野是很小的,它的大小與顯微鏡的總放大倍數(shù)成反比,總放大倍數(shù)越大時,顯微鏡的視野越小。因此奧林巴斯顯微鏡尤其是高放大倍數(shù)情況下,不可能在一個視野內(nèi)看到整個標本,只能觀察到標本的某個部位。需妥觀察標本的其他部位時,必須利用移動器移動標本,使標本中的各部分依次進入視野內(nèi),輪流觀察。
鏡象亮度是指奧林巴斯顯微鏡中所看到的物象的亮暗程度。要看清楚物體的細節(jié),必須要求一定的亮度,也就是鏡象亮度,它和數(shù)值孔徑的平方成正比,和總放大倍數(shù)的平方成反比。在物鏡相同的情況下,使用5X的目鏡比使用10X的目鏡,鏡象亮度要大4倍,因此要想使鏡象亮度大,可使用大數(shù)值孔徑的物鏡,配以低放大倍數(shù)的目鏡。
例如,使用40 X的N.A.為0.65的物鏡配以5X的目鏡與使用10x的N.A.為0.25的物鏡配以20X的目鏡相比較,雖然總放大率都是200 X,但是前者的鏡象亮度比后者大6.8倍。在實際觀察物體時,并不是鏡象越亮越好,如果鏡象亮度太大,一通過標本的光線太強,會影響圖象的反差且不利于保護眼睛視力,所以要求將鏡象亮度調(diào)至適中,同時按不同標本厚度加以調(diào)節(jié),對于厚的標本可適當增加亮度,反差好的標本也可適當增加亮度。
奧林巴斯顯微鏡的幾個主要性能之間有著一定的相互關(guān)系。能否看清楚小的物體或細節(jié),主要決定于物鏡的分辨率,即數(shù)值孔徑,并不決定于倍數(shù),認為倍數(shù)越高看得越清楚的想法是不完全正確的。如果不增高分辨率。只是盡量增大倍數(shù),雖可以獲得更高的放大倍數(shù)的圖象,但是并不可能看出更多的細節(jié),這種放大叫做“空的放大”。為了充分利用物鏡的分辨率,奧林巴斯顯微鏡的總放大倍數(shù)相應(yīng)也不能太小,否則本來可以看清楚的一些物體細節(jié),會由于總放大倍數(shù)過小,擠在一起而分辨不出。
同一物鏡分辨率隨放大倍數(shù)增大而提高,隨倍數(shù)減小而降低,例如數(shù)值孔徑為0.65的物鏡,在總放大倍數(shù)小于160倍時,分辨率降為7微米,當總放大倍數(shù)增至1600倍時,分辨率提高到1.6微米以上。
顯微鏡合適的總放大倍數(shù)決定于物鏡數(shù)值孔徑N.A.值的500倍至1000倍,若N.A.值為0.65的40倍物鏡,合適的總放大倍數(shù)應(yīng)為0.65x500倍。0.65 x1000即325倍至650倍。因此,為了達到合適的總放大倍數(shù)應(yīng)配合適當倍數(shù)的目鏡。

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